.虾过敏症特异性IgE的ELISA检测方法的研究[J].中国海洋药物,2010,29(4):22-27-. |
虾过敏症特异性IgE的ELISA检测方法的研究 |
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中文关键词: 刀额新对虾 过敏症 变应原 特异性IgE 酶联免疫吸附试验 |
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目的研制虾过敏症特异性IgE的ELISA检测试剂。方法以纯化的刀额新对虾的2种主要变应原30 kD和33 kD蛋白为抗原分别包被酶标反应板,对抗原的包被浓度和时间、封闭液的选择与封闭时间、酶标二抗稀释度等ELISA条件进行优化。结果 30 kD和33 kD变应原的最适包被浓度分别为200 ng/孔和12.5ng/孔,最适包被条件为37℃孵育3 h,4℃过夜;酶标反应板的封闭以1.0%BSA、4℃封闭过夜为最适条件;HRP标记的羊抗人IgE抗体以1∶1 500为最适稀释度。结论以刀额新对虾的33 kD主要变应原为诊断抗原研制特异性IgE的ELISA检测试剂,适用于临床虾过敏症的实验诊断。 |
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