| .利用增强型绿色荧光蛋白基因作筛选标记克隆载体的构建及鉴定[J].中国海洋药物,2009,28(2):28-31-. |
| 利用增强型绿色荧光蛋白基因作筛选标记克隆载体的构建及鉴定 |
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| 中文关键词: 增强型绿色荧光蛋白 大肠杆菌 阳性克隆 筛选载体 |
| English Keywords: |
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| 中文摘要: |
| 目的构建以增强型绿色荧光蛋白(EGFP)为筛选标记的新型pUC18筛选载体。方法将EGFP基因克隆至pUC18载体的PstI/HindⅢ位点,构建筛选载体pUC18-EGFP,并验证pUC18-EGFP能否利用EG-FP的荧光特性筛选出含基因重组体的阳性克隆。结果经酶切和基因测序鉴定pUC18-EGFP载体构建正确;在外源基因插入该载体后,对LB氨苄平板上的绿色菌落进行酶切和基因测序鉴定,结果证明LB平板上的绿色菌落即为含有重组质粒的克隆。结论成功构建pUC18-EGFP筛选载体,利用EGFP的绿色荧光可筛选出阳性克隆。 |
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