.食源性ACE抑制肽体外活性检测方法的改进及应用[J].中国海洋药物,2009,28(4):5-8-. |
食源性ACE抑制肽体外活性检测方法的改进及应用 |
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中文关键词: 血管紧张素转化酶 ACE抑制肽 反相高压液相色谱 马尿酸 |
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中文摘要: |
目的建立一种快速、准确地测定食源性ACE抑制肽体外活性的检测方法。方法通过在不同时间对ACE酶解液中马尿酸含量的测定,确定ACE酶与底物HHL的反应时间;以海参肽为ACE抑制剂,反应液中生成的马尿酸为检测指标,Zorbax SB-C_(18)分析柱为固定相,乙腈/超纯水为流动相,建立一种测定食源性ACE抑制肽体外活性的RP-HPLC法。结果ACE酶与底物HHL的反应时间确定为60min;RP-HPLC的洗脱条件为柱温25℃,流动相乙腈/超纯水的体积比为1:1(各含0.1%三氟乙酸),流速0.4 mL·min~(-1),检测波长228 nm。应用该方法对马尿酸浓度与峰面积的相关性进行分析,结果表明马尿酸浓度在0~200μg·mL~(-1)和200~800μg·mL~(-1)范围内与峰面积呈现良好的相关性;经卡托普利、牡蛎酶解液、鳀鱼酶解液验证,表明该方法不仅适用于食源性ACE抑制肽体外活性的测定,而且也适用于化学合成的降压药物。结论该方法操作简便、重复性好、准确性高,可作为食源性ACE抑制肽体外活性的检测方法。 |
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