| 唐甜,徐银凤,卢瑜,等.CLDN18.2纳米抗体的筛选及鉴定[J].中国海洋药物,2026,(2):-. |
| CLDN18.2纳米抗体的筛选及鉴定 |
| Screening and identification of anti-CLDN18.2 nanobodies |
| 投稿时间：2025-01-27 修订日期：2025-03-08 |
| DOI： |
| 中文关键词: 纳米抗体 噬菌体展示技术 CLDN18.2 全细胞淘选 海洋毒素 |
| English Keywords: |
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| 中文摘要: |
| 目的 开发靶向CLDN18.2的羊驼纳米抗体,为海洋毒素类抗体偶联药物的开发提供新的候选抗体分子。方法 以高表达CLDN18.2的稳转细胞株为免疫原免疫羊驼,提取羊驼外周血淋巴细胞RNA并反转录为cDNA,构建羊驼纳米抗体噬菌体展示文库并扩增。通过全细胞淘选的方式筛选并富集特异性噬菌体,通过单克隆Phage ELISA确定靶向CLDN18.2的纳米抗体序列,使用大肠杆菌表达系统制备靶向CLDN18.2的纳米抗体,通过流式细胞术进一步鉴定其与CLDN18.2稳转细胞株的结合能力。结果 经过5次免疫后构建的羊驼纳米抗体噬菌体展示文库的库容量为1.16×10^9 CFU/mL,共筛选并制备得到24株不同的靶向CLDN18.2的纳米抗体,均与细胞有不同水平的结合,其中9株纳米抗体的细胞结合活性较高。结论 成功筛选获得了高特异性、高亲和力的靶向CLDN18.2的羊驼纳米抗体,为海洋毒素类抗体偶联药物的开发提供了新的候选抗体分子,在高表达CLDN18.2相关疾病的疾病诊断、肿瘤治疗等领域具有广阔的应用前景。 |
| English Summary: |
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